In vitro fertilization of porcine oocytes with fresh and frozen-thawed ejaculated or frozen-thawed epididymal semen obtained from identical boars

Zielsetzung der Untersuchung war ein Vergleich der In-vitro-Befruchtungskapazität von Schweinespermatozoen aus frischem und tiefgefrorenem, aufgetautem Sperma und tiefgefrorenem, aufgetautem Nebenhodenschwanzsperma von denselben Ebern. Vor der In-vitro-Befruchtung (IVF) wurden die frischen Spermatozoen in TCM 199 kapazitiert. Die tiefgefrorenen Spermaproben wurden in 0,25 ml Straws in einm Laktose-Glycerol/Orvus-ES-Paste-Verdünner aufbewahrt Die Befruchtung der Kumulus-Oozyten-Komplexe superovulierter präpuberaler Jungsauen erfolgte innerhalb von 2 Stunden nach Aspiration mit einer der Spermaproben. Nach der Endverdünnung für die IVF zeigte das tiefgefrorene, aufgetaute Nebenhodenschwanzsperma Motilitätsraten (72,2 +/- 5,6 %) ähnlich dem frischen (76,4 +/- 4,5 %) Sperma, wohingegen die Spermienmotilität des tiefgefrorenen aufgetauten ejakulierten Spermas gesunken war (40,2 +/- 9,4 %). Beträchtliche individuelle Unterschiede wurden in der Spermienmotilität zwischen den Ebern beim ejakuliertem Sperma, aber nicht beim Nebenhodenschwanzsperma gefunden Eine erhöhte Befruchtungskapazität der tiefgefrorenen, aufgetauten Nebenhodenschwanzspermatozoen wurde anhand Vorkernbildung und Schlupfrate und signifikant mehr Embryonen im Vergleich zu den Gruppen, die mit frischen oder tiefgefrorenen, aufgetauten Spermien befruchtet worden waren, gefunden (59,7 vs. 14,6 und 16 %). Konstante In-vitro-Befruchtungsraten mit minimaler Samenvariabilität wurden mit tiefgefrorenen, aufgetauten Nebenhodenschwanzspermien erzielt. Mit einem modifizierten Einfrierprotokoll können die Spermatozoen des Nebenhodenschwanzes leicht in kleinen Behältern für die IVF eingefroren werden. Sie zeigen höhere Motilität und Befruchtungsraten als ejakulierte Spermien.