Erste Ergebnisse zur Mobilität von gusA-spezifischen Silencing-Signalen in Apfelpflanzen
RNA-Interferenz (RNAi) ist ein mobiler, RNA-vermittelter Mechanismus zum Stilllegen von Genen (Silencing), der in vielen Eukaryonten einschließlich der Pflanzen vorhanden ist. Um eine systemische Ausbreitung des Silencing-Effekts erstmalig in Apfelpflanzen zu untersuchen, wurde mit Hilfe des binären Vektors pHELLSGATE8::sigus ein RNAi-Konstrukt in das Genom eines ‚Pinova’-Sämlings übertragen, welches ein gusA „Hairpin“-RNA-Homolog (sigus) exprimiert. Anschließend wurden die gewonnenen sigustransgenen Apfelpflanzen mit gusA-transgenen Pflanzen veredelt. Untersuchungen mittels Real-Time PCR und Gus-Färbung zeigten, dass die gusA-Expression in den gusA-transgenen Sprossen im Vergleich zu gusAtransgenen Pflanzen, die auf nicht-transgene Unterlagen veredelt waren, reduziert war.
RNA interference is a mobile, RNA-guided, gene regulatory mechanism in many eukaryotes, including plants. Using the vector pHELLSGATE8::sigus, we transferred a RNAi construct based on a gusA hairpin RNA homolog (sigus) into the genome of a ‘Pinova’ descendant, to evaluate the mobility of silencing for the first time on a woody plant like apple. Following, gusA transgenic apple shoots were grafted onto sigus transgenic rootstocks. Real-time PCR and GUS staining assays showed that the gusA expression in the gusA transgenic scion was clearly decreased compared to control shoots grafted onto non-transgenic shoots.