Expression von Epitopen der Rifttalfiebervirus Glykoproteine und Evaluation ihrer immunogenen Wirkung

Rifttalfiebervirus ist ein zoonotisches Arbovirus, für das es in Europa bisher keine zugelassenen Impfstoffe gibt. Über die Impfung der Hauswiederkäuer könnte, die Virusausbreitung eingedämmt und Infektionen bei Menschen verhindert werden. Die kleinste Proteineinheit, die erforderlich ist, um eine Immunantwort zu erzeugen, die vor einer Infektion schützt, wurde gesucht. Zum einen wurde die Aminosäuresequenz der Glykoproteine mit computergestützten Modellen analysiert und zum anderen in einer ELISA-basierten Methode (Pepscan). Mit dem Pepscan war es möglich, mehrere immunogene Regionen zu definieren, aus denen drei Gn- und vier Gc-Peptide für die Expression ausgewählt wurden. Diese Peptide wurden als Fusionsproteine mit verschiedenen Trägerproteinen in Drosophila melanogaster S2-Zellen und E. coli exprimiert. Sie induzierten spezifische Antikörper in Mäusen. Es wurde ein Infektionsmodell für Mäuse und Schafe etabliert um Impfstoffe zu testen. Dafür wurden die beiden hochvirulenten RVFV-Stämme 35/74 und ZH501 verglichen. Beide Stämme erwiesen sich als geeignete Kandidaten. Es gab keinen signifikanten Unterschied in der Viruslast oder der Überlebensrate bei Mäusen. RVFV-35/74 wurde für die Impfstoffstudie ausgewählt. RVFV-ZH501 infizierte Schafe hatten zwei Tage nach der Infektion die höchsten Virustiter begleitet von einer Fieberspitze. Eine zweite Temperaturspitze sechs bis sieben Tagen nach Infektion ging nicht mit einer Virämie einher. Die Viruslasten in den Organen der Schafe unterschieden sich nicht zwischen den RVFV-Stämmen, nur die Viruslasten im Blut am zweiten Tag nach der Infektion waren signifikant unterschiedlich. Beide Stämme eigneten sich zur Überprüfung eines Impferfolgs im Schaf. Ein Impfstoffkandidat, ein GnTE3 genannter Gn-Abschnitt, gekoppelt an Lumazinsynthase, bewirkte eine signifikante Erhöhung der Überlebensrate in Mäusen nach Infektion mit RVFV-35/74. Dies war auf die, durch das Trägerprotein hervorgerufene, proinflammatorische Immunantwort zurückzuführen. Die Viruslasten zwischen immunisierten und nicht-immunisierten Mäusen unterschieden sich nach RVFV-35/74 Infektion nicht.