Performance of complement fixation test and confirmatory immunoblot as two-cascade testing approach for serodiagnosis of glanders in an endemic region of South East Asia
Various serological tests were used for the diagnosis of glanders in the past but still complement fixation test (CFT) is the internationally prescribed test for trading equines. A new immunoblot (IB) technique has recently been introduced to overcome the well known shortcomings of CFT i.e. a considerable number of false positive and negative results and anticomplementary effects of sera. The objective of this study was the comparative evaluation of two glanders CFT antigens commercially available at Central Veterinary Institute of Wageningen UR, Lelystad, NL (CIDC) and at c.c.pro GmbH, Oberdorla, DE (c.c.pro) in a glanders endemic area regarding specificity and sensitivity. A total of 1678 serum samples from the endemic region (Province Punjab, Pakistan) and a non-endemic area (Germany) were analysed. All sera tested positive or suspicious with CFT were analysed by the confirmatory IB to exclude CFT false positive results. Both CFT antigens showed 100% sensitivity. The use of CIDC or c.c.pro antigen resulted in specificities of 77.45% or 75.71% for sera from endemic area and 93.75% or 94.79% for sera from non-endemic areas, respectively. The results demonstrate the different performances of identical tests in different epidemiologically settings. Based on these results, the combined use of CFT and IB is highly suggestive for the serodiagnosis of glanders. Good agreement was calculated between CFT (using either c.c.pro or CIDC antigen) and immunoblot.
Für die serologische Diagnostik von Rotz sind verschiedene Testverfahren beschrieben, die Komplementbindungsreaktion (KBR) ist jedoch die für internationale Handelsuntersuchungen vorgeschriebene Methode. In der Diagnostik mit der KBR bereiten falsch positive oder negative Ergebnisse oder Proben mit antikomplementären Eigenschaften immer wieder Probleme. Deshalb wurde kürzlich ein Immunoblot-Verfahren (IB) als Bestätigungstest zur KBR etabliert. Gegenstand dieser Studie war die vergleichende Evaluierung zweier Rotz-KBRAntigene, kommerziell erhältlich bei Central Veterinary Institute in Wageningen UR, Lelystad, NL (CIDC) und c.c.pro GmbH, Oberdorla, DE (c.c.pro) in einer Rotz-endemischen Region hinsichtlich ihrer Spezifität und Sensitivität. Insgesamt wurden 1678 Serumproben aus einer endemischen Region (Provinz Punjab, Pakistan) und einer nicht endemischen Region (Deutschland) gestestet. Alle KBRpositiven und -verdächtig reagierenden Proben wurden mittels IB untersucht, um falsch positive KBR-Ergebnisse auszuschließen. Beide KBR-Antigene zeigten eine Sensitivität von 100 %. Die KBR unter Einsatz des CIDC- oder c.c.cpro-Antigens zeigte Spezifitäten von 77.45 % oder 75.71 % bei Anwendung an Proben aus der endemischen Region und 93.75 % oder 94.79 % bei Proben aus der nicht endemischen Region. Die Ergebnisse zeigen, dass die Spezifität identischer serologischer diagnostischer Verfahren, angewendet in Regionen mit unterschiedlicher epidemiologischer Lage, erheblich schwanken kann. Ausgehend von diesen Ergebnissen wird für die serologische Diagnostik von Rotz die Kombination von KBR und Immunoblot empfohlen.
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